細(xì)菌過(guò)濾測(cè)試儀菌液配置

1.1.1儀器

kou罩細(xì)菌過(guò)濾效率(BFE)檢測(cè)儀、高壓蒸汽滅菌器、電子天平、生化培養(yǎng)箱、超凈工作臺(tái)、菌落計(jì)數(shù)儀。

1.1.2試劑及材料

蒸餾水、75%消毒酒精、胰蛋白酶大豆瓊脂（TSA）、胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基(TSB)、蛋白胨、酒精燈、90mm培養(yǎng)皿、500mL錐形瓶。

細(xì)菌懸浮液制備

培養(yǎng)基配置

取500mL錐形瓶，按照要求精確稱取一定量的TSA培養(yǎng)基，加入合適比例的蒸餾水，包扎后放入高壓蒸汽滅菌器，121°C滅菌15min，滅菌結(jié)束后取出，待其冷卻至約50°C時(shí)，將培養(yǎng)基逐個(gè)倒入無(wú)菌培養(yǎng)皿中，操作應(yīng)在超凈工作臺(tái)中進(jìn)行，以酒精燈的火焰周圍作為無(wú)菌區(qū)域，避免雜菌污染，每個(gè)培養(yǎng)皿中應(yīng)倒入約27mL培養(yǎng)基。

無(wú)菌確認(rèn)

待培養(yǎng)基冷卻凝固后，將其倒置放入恒溫培養(yǎng)箱中，37°C條件下培養(yǎng)24h，將有菌落生長(zhǎng)的培養(yǎng)皿舍棄不用，無(wú)雜菌生長(zhǎng)的取出備用。

細(xì)菌懸浮液制備

挑取一環(huán)金黃色葡萄球菌ATCC6538接種在適量胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基中，在（37±2）°C振蕩培養(yǎng)（24±2）h，然后用1.5%的蛋白胨將上述培養(yǎng)物稀釋至約5×105cfu/ml。